大肠菌群计数实验
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1.采样方法 (1)例如:车间原料和产线制作固体食品,用无菌采样工具从5个不同部位现场采集样品,放入5个无菌采样容器内作为5件食品样品。每件样品的采样量应满足微生物指标检验单位的要求。 (2)例如:包装好的食品,采集相同批次、独立包装、适量件数的食品样品,每件样品的采样量应满足微生物指标检验单位的要求。 2.检验器材准备 (1)剪子、镊子干热灭菌160℃3小时,移液枪枪头121℃30分钟 3.培养基和试剂准备 (1)稀释液0.85%的生理盐水 (2)例如:配置1000ml,称取8.5氯化钠溶解后分装到均质罐中 (3)结晶紫中性红胆盐琼脂VRBA平板制备 (4)例如:配置200ml,称取8.3g培养基至蒸馏水中,调整PH,煮沸后置于46℃±0.5℃水浴锅中平衡,用于倾注平板 4.实验室环境准备 (1)实验前环境75%酒精消毒,紫外半小时以上,紫外灯关后半小时进入实验 5.实验阶段 (1)进入更衣前,填写《洁净区进入登记表》 (2)进入更衣后需消毒佩戴口罩、帽子、一次性鞋套和一次性无菌手套 (3)进入无菌室后观察环境条件是否符合实验室要求,填写《环境条件监控记录》 6.配置阶段 (1)固体和半固体样品,称取25g样品至有渗有225ml生理盐水的无菌均质袋中,用拍打式均质器拍打两分钟,制成1:10的样品匀液,样品匀液的PH应在6.5-7.5之间,必要时要用1mol/l氢氧化钠或1mol/l盐酸调节

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